革蘭氏染色液

英文名稱(chēng):

貨 號 :KS0009

規 格 :5ml*5支

價(jià)格:電詢(xún)

用途:用于革蘭氏染色。(BR試劑)

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商品詳細
說(shuō)明書(shū)

革蘭氏染色液使用說(shuō)明書(shū)

【試劑盒組成】

1.      結晶紫染色液:5ml×1 支

2.     碘液:5ml×1 支

3.     脫色液:5ml×2 支

4.      沙黃復染液:5ml×1 支


【原理】

通過(guò)結晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合 物,革蘭氏陽(yáng)性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,故遇乙醇或丙酮 脫色處理時(shí),因失水反而使網(wǎng)孔縮小,再加上它不含類(lèi)脂,故乙醇處理不會(huì )出現縫隙, 因此能把結晶紫與碘復合物牢牢留在壁內,使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細胞壁 薄、外膜層類(lèi)脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,在遇脫色劑后,以類(lèi)脂為主的外膜迅 速溶解,薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結晶紫與碘復合物的溶出,因此通過(guò)乙醇脫色后 仍呈無(wú)色,再經(jīng)沙黃等紅色染料復染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

 

【操作方法】

1.    準備好革蘭氏染色所需試劑、玻片、吸水紙、鑷子、接種環(huán)、廢液缸、洗瓶、去離 子水、酒精燈等,待檢測的菌株一般應為新鮮培養物;

2.    以酒精擦拭玻片,在酒精燈上干燥后,用接種環(huán)挑取一環(huán)滅菌的去離子水或生理鹽 水到載玻片上,挑取少量純培養物在水滴上涂抹至均勻分散,將涂片在酒精燈火焰 上滅活、固定;

3.    加結晶紫溶液 1-2 滴,染色 1 分鐘,用去離子水輕輕從培養物上方流過(guò)水洗; 4.    待干,加革蘭氏碘液,作用 1 分鐘,用去離子水輕輕從培養物上方流過(guò)水洗;

5.    加脫色液(95%酒精),不時(shí)搖動(dòng)玻片,直至無(wú)紫色脫落為止(約 10-20 秒),用去 離子水輕輕從培養物上方流過(guò)水洗;

6.    待干,加復染液,復染 30 秒。用去離子水輕輕從培養物上方流過(guò)水洗,待玻片干 燥后鏡檢;

7.    油鏡鏡檢。菌體呈紫色者為革蘭氏陽(yáng)性菌;呈紅色者為革蘭氏陰性菌。

 

【注意事項】

1.     培養物要新鮮,以免對結果的判斷造成影響;

2.     酒精洗脫為關(guān)鍵步驟,不可長(cháng)時(shí)間洗脫,以免對結果判斷造成影響; 3.     碘液容易揮發(fā),平時(shí)應擰緊瓶蓋、避光保存;

4.     涂片可采用自然風(fēng)干、干燥箱等方法進(jìn)行干燥;

5.     每一步水洗時(shí),注意不要直接對著(zhù)涂片沖洗,水流應從上方流經(jīng)涂片,輕輕水洗。

 


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